Introduction 1997 2001 2006 2000 2005 2000 2006 2004 2004 2006 2006 2001 2001 2003 2006 2007 sucrose uncoupled sun impaired sucrose induction isi glucose insensitive gin sugar insensitive sis aba2 isi4 gin1 sis4 aba3 gin5 ABA insensitive4 abi4 sun6 isi3 gin6 sis5 2000 2000 2000 2001 ABI4 1998 2002 2005 2006 ApL3 ApL3 2001 2005 ApL3 Oryza sativa Vitis vinifera VvHT1 ASR 2003 Zea mays Ivr2 2004 2007 gin sis HEXOKINASE1 HXK1/GIN2 GIN 1998 2001 2002 2003 ABA1 ABA2 ABA3 1998 gin ABA insensitive abi4 abi5 abi8 abi1-1 abi2-1 abi3-1 2000 2000 2000 2002 2004 ABI3 ABI3 2002 2004 abi3 2002 abi3 2006 2001 ABI3 ABI5 abi3 abi5 2002 2001 2002 2001 GIN ABI4 aba2-1 ABI4 ABI3 ABI3 2002 2005 ABI3 GIN ABI3 1992 2002 ABI3 1993 1995 2000 2001 2002 ABI3 PHYB 1999 2001 2003 2005 abi3 gin glucose insensitive abi3 gin aba1 abi4 abi5 abi3 era1 abi2-1 ABI3 GIN Material and methods Plant material aba2-1 ABI4 ABI4 ABI4 ABI4 Agrobacterium aba2-1 1998 Germination assays in duplo Sugar response assays gin gin isi aba2-1 ApL3 sun PC Gene expression analysis er abi3-1 abi3- 2003 2004 ® ® ® T AtACTIN2 ACT2 EM1 http://www.catma.org EM1 EM1 1 Table 1 Primers and probes used for gene expression analysis Gene Forward primer Reverse primer Probe ACT2 gctgagagattcagatgccca atgggagctgctggaatccac agtcttgttccagccctcgtttgtgc ABI3 cacagccagagttccttccttt tgtggcatgggaccagact cttgaatctccaccgtcatggccac ABI4 cggtgggttcgagtctatcaa cggatccagacccatagaaca acctcatccaccgccgttggttga ABI5 ggaggtggcgttgggttt gggcttaacggtccaacca tcccatttgctgtccacccgct EM1 agatgggacacaaaggaggag tgttggtgaactttgactcatcg EM6 ggtacgggaggcaaaagctt ttgcgtcccatctgctgata RAB18 gagcaactccacaaggaaag gtagccaccagcatcatatc ApL3 cgagaagtgccggattgtaaa ggaacgttggatgctgcatt cccaagaaacatccgtgtgagattaccg PC tctttgaaggatttcggtgtca catggccatcgcatttcca aaacgatcgaagctgctgttgccact Results ABI4 ABI4 2000 2000 2000 2001 ABI4 ABI4 aba2-1 ABI4 aba2-1 ABI4 1 ABI4 2000 ABI4 ABI4 1 Fig. 1 ABI4 aba2-1 aba2-1 a ABI4 aba2-1 b c ApL3 aba2-1 d gin aba2-1 1 aba2-1 gin 1 2003 ABI4 aba2-1 ABI4 aba2-1 ABI4 ABI4 gin 1 gin aba2-1 aba 1 2000 ABI4 ApL3 ApL3 2001 isi ApL3 aba2 isi4 abi4 isi3 ApL3 2001 ApL3 aba2-1 ApL3 ApL3 1 ApL3 aba2-1 isi aba2 isi4 2001 aba2-1 ABI4 ApL3 ApL3 1 Glucose and ABA trigger a similar developmental early seedling arrest 2 1998 2000 2007 2001 2 2 2 2 Fig. 2 er a b c c 2001 2 ABI3 ABI5 abi3 abi5 2001 2002) LEA 1994 1994 2000 2002 2002 LEA LEA 2002 LEA ABI5 GIN ABI5 2000 2000 2002 2003 ABI5 ABI3 ABI5 AtEM1 AtEM6 RAB18 2 2 ABI3 ABI5 LEA 2002 ABI3 ABI3 Table 2 Relative expression levels of ABI3, ABI5, EM1, EM6 and RAB18 after glucose treatment Gene Treatment Exp. 1 Exp. 2 Exp. 3 ABI3 t = 0 1 1 1 con 0.14 0.09 0.06 sorb 2.2 0.19 1.7 glc 9.0 4.5 7.9 ABA 17 8.3 6 ABI5 t = 0 1 1 1 con 0.48 0.20 0.29 sorb 8.7 0.41 12 glc 19 13 19 ABA 40 41 23 EM1 t = 0 1 1 1 con 0.26 0.34 0.20 sorb 74 0.71 164 glc 79 72 300 ABA 749 742 200 EM6 t = 0 1 1 1 con 0.22 0.14 0.15 sorb 36 0.38 78 glc 51 40 173 ABA 450 132 237 RAB18 t = 0 1 1 1 con 0.16 0.12 0.00 sorb 77 0.46 1.7 glc 324 41 6.2 ABA 6186 333 15 The relative expression levels of five genes were determined using quantitative RT-PCR. The gene expression levels were measured at t = 0 and after a 24 h treatment on control media (con, half-strength MS + 1% sucrose) and on con media supplemented with either 8% sorbitol (sorb), 8% glucose (glc) or 10 μM ABA (ABA) media. The expression level at t = 0 was set to 1. The experiment was performed three times and the results for each experiment are indicated 3 ABI3 ABI5 LEA AtEM1 AtEM6 RAB18 3 ABI3 ABI5 LEA 2001 2002) ABI3 ABI5 EM1 EM6 RAB18 3 3 ABI3 ABI5 LEA ABI4 ABI5 2003 2001 Fig. 3 ABI3 ABI5 LEA EM1 EM6 RAB18 ABI3 ABI5 er 2002 ABI4 aba2-1 GIN ABI4 GIN ABI3 ABI5 2001 2002 2003 2005 ABI5 abi5-1 gin abi4 ABI5 2000 2000 2002 2003 2 ABI3 2001 2003 2004 2007 ABI3 ABI3 GIN gin abi3 abi3 glucose insensitive er abi3 abi3 abi3-1 abi3-5 1993 er abi3-1 abi3-5 abi3 gin 4 4 gin abi3 gin abi3-1 aba1-1 er aba1-1 gin 2000 2000 2000 aba1-1 abi3-1 4 gin Fig. 4 abi3 gin er abi3-1 abi3-5 a gin abi3-1 aba1-1 b abi3-8 abi3-9 abi3-10 abi3-11 abi3-12 abi3-13 gin abi3 gin abi4-3 abi5-7 gin 2002 2002 3 abi3-8 abi3-9 abi3-10 abi4-3 abi5-7 abi3-12 abi3-13 abi3-13 abi 2002 2002 gin abi4 gin6 abi5 2000 2000 2000 gin abi3 abi3-1 abi3-5 abi3 gin abi3 gin abi4-3 abi5-7 3 abi3 gin abi3-11 abi3-12 abi3-13 abi gin abi3-11 gin gin abi3 abi3 gin abi3 gin aba1 abi4 abi5 Table 3 Glucose insensitive phenotype of six abi3 alleles Genotype Treatment con 7% sorb 7% glc 10 μM ABA a WT Col 100 99 2 0 0 abi4-3 99 98 94 100 100 abi5-7 99 98 89 96 100 abi3-8 100 100 97 91 100 abi3-9 100 100 100 100 100 abi-310 100 100 100 100 100 abi3-11 100 100 5 2 0 abi3-12 100 96 33 83 50 abi3-13 100 100 98 40 0 abi4-3 abi5-7 abi3 a 2002 ABI4 ABI5 RAB18 abi3 ABI3, ABI4 ABI5 LEA 2000 2002 2003 ABI3 ABI4 ABI5 RAB18 LEA abi3-1 abi3-5 RAB18 ABI5 5 abi3-1 abi3-5 5 ABI4 ABI5 RAB18 ABI4 ABI4 5 ABI4 abi3 abi3 RAB18 ABI4 ABI5 abi3-5 Fig. 5 abi3 er abi3-1 abi3-5 abi3-5 er er abi3 RAB18 a ABI4 b ABI5 c er abi3 abi3-1 abi3-5 er abi3 d abi3 ABI 2000 ABI3 LEA 1994 2005 abi3 5 RAB18 abi3-1 RAB18 ABI4 er abi3-1 abi3 abi3-1 sis sun glucose-induced delay of germination sis 2000 gin sis gin1 sis4 aba2 gin6 sis5 abi4 gin4 sis1 ctr1 sis er abi3-1 abi3-5 abi3 6 sis gin Fig. 6 abi3-1 abi3-1 sugar insensitive sis er abi3-1 abi3-5 a er abi3- abi3-5 b sucrose uncoupled sun PC PC sun PC 1997 PC PC-LUC sun6 abi4 er abi3-1 PC c abi3-1 er d abi3-1 e 1997 sun PC 1996 sun PC 1997 sun6 abi4 2000 sun abi3-1 PC PC sun6 abi4-3 PC-LUC sun 6 abi3-1 PC abi3 sun 6 abi4 PC abi3 PC abi3 sun glucose-induced delay of germination 2002 2003 2004 2006 abi abi1-1 abi2-1 abi4 abi5 2003 2004 gin6 abi4 gin2 hxk1 2003 2004 abi3-1 abi3-5 abi3 2006 abi3-1 er abi3-1 abi3-1 6 er abi3-1 abi3-1 er abi3-1 abi2-1 era1-2 ABI3 ABI4 ABI5 abi2-1 era1 2003 ERA1 ABI1 ABI5 era1 abi ABI1 ABI2 ERA1 ERA1 ABI3 ABI4 ABI5 2003 ABI2 abi2-1 1984 1997 er abi2-1 abi3-1 abi3 abi2-1 gin abi3-1 7 Fig. 7 abi2-1 era1-2 er abi2-1 abi3-1 a era1-2 glucose oversensitive era1-2 b ERA1 1996 era1-2 ERA1 glucose oversensitive glo era1-2 era1-2 era1-2 era1-2 7 era1-2 glo era1-2 1996 era1-2 era1-2 era1-2 Discussion GLUCOSE INSENSITIVE ABI3 ABI3 GIN ABI3 ABI3 ABI3 2 ABI3 ABI3 abi3 LEA GIN ABI4 ABI5 RAB18 ABI5 ABI4 abi3 5 gin abi3 er abi3 gin gin aba1 abi4 abi5 4 3 ABI3 GIN ABI3 AtABI3 CnABI3 2002 2004 2005 ABI3 abi3 RAB18 gin ABI3 ABI3 ABI3 2002 2004 abi3 2002 gin abi3-1 er er 2000 abi3-1 gin abi3-1 gin 6 2007 gin abi3 er abi3-1 abi3-5 sis 2000 abi3 2006 6 abi3 sun ABI3 HSI2 2005 Glucose and ABA induce a similar early seedling arrest in Arabidopsis ABI3 ABI4 ABI5 GIN 2003 LEA EM1 EM6 RAB18 ABI LEA 1994 1998 2000 2002 2005 LEA 2001 ABI3 ABI4 ABI5 ABI3 ABI5 LEA 2001 2002) LEA 2001 ABI3 ABI5 LEA gin LEA 2003 Medicago truncatula Cucumis sativa 2004 1991 2001 1988 1995 Interactions between sugar and ABA signalling gin 2007 gin2 hxk1 HXK1 HXK1 2003 + 2006 gin gin1 aba2 gin5 aba3 gin6 abi4 ABI4 ABI4 aba2-1 ABI4 ABI4 ApL3 ISI ABI4 2000 ABI4 gin aba2-1 ABI4 1 ABI4 GIN GIN ISI GIN ABI4 ABI4 isi aba2-1 gin isi ABI4 ABI4 ABI5 2000 2000 2000 2002 ABI3 GIN 2002 ABI3 2 2005 ABI3 ABI3 1999 2000 abi3 1993 abi3 1995 2001 2001 abi3 abi2 era1 abi2-1 gin abi3-1 abi3 abi3-1 abi2-1 abi2-1 abi3-1 1984 1990 gin era1-2 glucose oversensitive era3 glo Era3 ethylene insensitive2 ein2 2000 1998 2001 2003 aba2 ABI4 ABI4 2003 HXK1 gaolaozhuangren2 gin 2004 ABI3 ABI1 ABI2 ABI4 ABI5 2005 2006 6